1 发病情况 某个体饲养户饲养育肥猪300头左右,体重已达75~80 kg,自2005年2月初开始发病,投药治疗月余,先后用过庆大霉素、头孢菌素、土霉素、磺胺六甲氧嘧啶等,病猪未见明显好转,体重不增反降,陆续死亡70多头。?
2 临床症状 病猪体温高达42℃,全身皮肤发红,注射退烧药后,体温暂时下降,但不久又上升。喘,咳嗽,严重的呈犬坐姿势。食欲明显减少或废绝。有的病猪还出现关节肿胀、跛行。濒死猪结膜发绀,颈下、腹下及四肢未端等处皮肤有紫红色出血斑点,个别病猪出现血尿或口鼻流出淡红色泡沫样液体。?
3 剖检变化 剖检病死猪呈现纤维素性胸膜肺炎,肺脏充血、肿大,与胸壁粘连。胸腔有混浊液体,混有纤维素碎片。心包增厚,外面附着一层纤维素性渗出物,心包与心肌外膜粘连,整个心脏外观呈“绒毛心”状。全身淋巴结有不同程度的肿大、充血和出血,脾脏肿大,肝、肾轻度肿大。切开肿大的关节可见关节囊内有黄色胶冻样液体,关节囊膜面充血、粗糙。?
4 实验室检验
(1)取病死猪心、脾、肺、淋巴结等触片镜检,可见革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性单个、成双或成短链的球菌。无菌采取病料直接划线于麦康凯琼脂平板、血清琼脂平板、巧克力琼脂平板,同时接种于皮克增菌液做链球菌选择性增菌,37℃培养24 h后,挑取皮克增菌液转接种于绵羊血琼脂平板。挑取各类琼脂平板上的可疑菌落,反复纯化后做生化试验,最终鉴定获得两株细菌,分别为大肠杆菌和β溶血性链球菌。没有分离到胸膜肺炎放线杆菌和多杀性巴氏杆菌。
(2)将2株细菌的肉汤培养物腹腔接种小鼠,证实对小鼠有强致病性,实验组小鼠均在48 h以内死亡,对照组全部健活。
(3)用分离的2株细菌做药敏试验,β溶血性链球菌对青霉素类药高度敏感,而大肠杆菌却表现高度耐药,只对新霉素中度敏感。
(4)采集发病猪血10份,用美国IDEXX公司生产的猪瘟病原检测ELISA试剂盒,按试剂盒说明用抗凝血提取外周白细胞,和病死猪组织样品一起做猪瘟病原ELISA检测,结果全部为阴性。
(5)采用北京世纪元亨动物防疫技术有限公司生产的圆环病毒Ⅱ抗体检测ELISA试剂盒检测10份猪血清样品,结果全部为阴性。
(6)采用华中农业大学动物医学院生产的猪胸膜肺炎抗体检测ELISA试剂盒检测10份猪血清样品,结果全部为阳性。
(7)采用北京望尔生物公司生产的猪蓝耳病抗体检测ELISA试剂盒检测10份猪血清样品,结果阳性7份,阴性3份。
(8)采集3头病死猪心、肺、脾、肾、淋巴结样品,用北京世纪元亨动物防疫技术有限公司提供猪圆环病毒Ⅱ PCR试剂盒,蓝耳病PCR试剂盒,分别按试剂盒要求提取DNA、RNA,做猪圆环病毒Ⅱ和蓝耳病PCR检测,结果猪圆环病毒Ⅱ PCR检测结果全部为阴性,猪蓝耳病PCR检测检出肺脏样品阳性2份,淋巴结样品阳性1份。?
经上述诊断,该群育肥猪为蓝耳病合并链球菌、大肠杆菌等多种细菌感染。?
5 讨论 蓝耳病主要表现为母猪繁殖障碍和仔猪断奶前后死亡率高,育肥猪感染很少死亡。所以各猪场通常免疫母猪,仔猪通过哺乳获得被动免疫,一般育肥猪不做蓝耳病免疫。但是蓝耳病病毒进入机体后,侵染巨噬细胞,各种组织的巨噬细胞对蓝耳病病毒均易感,肺泡巨噬细胞是蓝耳病病毒的靶细胞,尤其是青年猪的肺泡巨噬细胞,造成肺泡巨噬细胞数量减少,同时也降低了肺泡巨噬细胞对其他细菌或病毒的免疫力,使其他细菌和病毒继发感染,本次育肥猪发病,并发多种细菌感染,久治不愈,与猪群中存在蓝耳病的持续感染有密切关系,提示今后蓝耳病检测阳性的育肥猪群也应进行蓝耳病免疫。本次在主要表现呼吸道症状的病猪中分离到了致病性强、高度耐药的大肠杆菌,说明大肠杆菌在猪呼吸道病中也起一定作用,但它能否单独引起猪发生呼吸道病,尚需探讨。根据病猪的剖检症状,我们曾怀疑有猪胸膜肺炎放线杆菌感染,同时血清学检验也显示猪胸膜肺炎抗体阳性,但最终并没有分离到病原,可能与应用抗菌药物有关,也可能受其他细菌干扰没有分离到,这也是今后应该进一步探究的问题。