PRV的分离：OIE推荐下列两种方法从病猪脑、肝、脾、肺及呼吸道黏膜及扁桃体分离PRV，以确诊本病。

1．细胞培养  接种PK15，SK6等易感细胞系或原代肾细胞，细胞出现特征性病变后，可通过免疫荧光染色、病毒中和试验或ELISA等试验证实；于18—96h出现病变，有病变的细胞用H-E染色，镜检可看到嗜酸性核内包涵体。

2．兔体接种试验  L述悬液经2 000r/min离心10min，取上清液l～2mL经腹侧皮下或肌肉接种家兔，通常在36～48h发病。

3．家兔接种  采取病猪脑组织磨碎后，加生理盐水制成10%悬浮液，同时每毫升加青、链霉素各l oooiu，离心、沉淀、上清液备用。取健康家兔2只，于后腿多侧皮下注射上述组织上清液2mL，家兔于24h后表现有精神沉郁，发热，呼吸加快(98-100次／分)脉搏加快，家兔开始先舔接种部位，以后逐渐变成用力撕咬接种点，严重者可出现角弓反张，在地上翻滚，仔细观察患部可发现有出血性皮炎、局部脱毛、皮肤破损出血，家兔表现局部奇痒症状，4-6h后病兔衰竭，倒卧于一侧，痉挛，呼吸困难而亡。病料亦可接种于小鼠，但要用脑内或鼻腔接种，症状可持续12h，有痒的症状。但小鼠不如兔敏感。病料亦可直接接种猪肾或鸡胚的红细胞，可产生典型的病变。分离出的病毒可再用已知血清作中和试验确诊本病。