（一）临床综合诊断

本病发生于寒冷季节，多侵害幼龄动物。突然发生水样腹泻，发病率高而病死率一般较低，主要病变一般在小肠，根据这些特点，可以作出初步诊断。但是，轮状病毒病要与猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和仔猪黄痢、白痢区别，因此进行实验室检查是必要的。

（二）实验室诊断

1．病原学检查

(j)电镜检查：是常用的诊断法。将粪便提取液经超速离心浓缩，沉淀物用磷钨酸负染直接观察。直接电镜法检查粪样中的病毒粒子时，要求粪样中含108 /mL病毒粒子才可获得阳性结果。因此，应收集发病初期的腹泻粪样，其含毒量较高，易于检出。

(2)病毒分离：可用MA-104、CV-I、ST等传代细胞或猪、牛肾原代细胞等分离病毒。若粪便标本先用胰蛋白酶处理( 10-20tcg/mL)，可提高病毒的分离率。若仍不能适应细胞培养，则可将粪样抽提浓缩后感染剥夺初乳的同源动物1-2代，以提高适应细胞培养的成功率。

(3)聚丙烯酰胺凝胶电泳法：是目前较常用的方法。利用轮状病毒基因组分为1 1个片段的特征，直接从待检粪样重提取病毒核酸，进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAE)，硝酸银染色，观察其特征性图谱。此法尚可区分人和动物的轮状病毒。

此外，反向间接血凝法、乳胶凝集试验、免疫荧光法等亦常应用。

随着分子生物学新方法的不断涌现，核酸探针杂交技术、PCR技术也可用于轮状病毒的检测。1998年刘明军等人建立了用光敏生物素标记核酸探针检测A群轮状病毒，用生物素标记寡核苷酸探针检测B群轮状病毒的研究方法。

2．血清学检查    目前较常用的是ELISA双抗体夹心法及反向间接血凝抑制( RIHI)试验，亦有报道用微量补体结合试验进行抗体检测的。ELISA双抗体夹心法，已被世界卫生组织(WHO)列为轮状病毒的标准检测方法。

为了鉴定粪样中轮状病毒亚群和血清型特异性，最近建立了一种快速、简便的应用特异性单克隆抗体( Mabs)的ELISA。Y．Pongsuwanne等( 1989 )以此法调查了泰国人、牛、猪轮状病毒株的亚群和血清型分布，还用RNA构型分析和电镜技术对某些检样不能确定亚群或血清型的原因作了探讨。所有被检的牛和猪轮状病毒均显示亚群I特异性和长链RNA构型。值得注意的是，血清3型猪轮状病毒的检出率很高。

3．鉴别诊断  应特别注意与猪传染性胃肠炎(TGE)、猪流行性腹泻(PED)相区别，通过对粪便标本的电镜检查及ELISA试验即可区别、侯继波等( 1995)报道，斑点免疫渗滤试验用于猪的3种病毒性腹泻的诊断及鉴别诊断，其特异性高于常规ELISAo