PRRS病毒感染的发病机理与免疫反应方面分子学研究揭示更有效的PRRS疫苗生产方式

猪繁殖呼吸综合征(PRRS，蓝耳病)病毒感染的发病机理以及免疫反应/调节方面最近取得大量突破，根据H.J. Nauwynck和他在比利时根特大学的联署作者，他们在2011年的猪的新现与再现疾病国际论坛上发言指出。

猪繁殖呼吸综合征病毒是猪的一种重要病原，从1980年代末以来给养猪业带来了巨大的损失。1990年代末迅速推出了美国和欧洲型的弱毒苗，效果良好。灭活苗也有登记，但仅能够对已有免疫力发挥促进作用。

1990年初以来，欧洲和北美的分离株具有遗传同源性。然而，此后的十年当中，该病毒开始分化。这个过程就造成了更难于通过已有疫苗控制的、毒力更强的PRRS病毒。现在，要想开发出安全、高效、作用范围广的疫苗难度非常大。传统的“试验-错误/成功”方法不再那么有效。正是在这种背景下，人们开始寻求新一代的PRRS疫苗。要想得到更好的疫苗来对PRRS进行长期有效的控制，就必须依靠兽医基础研究。对发病机理和免疫反应过程的更好理解能够揭示新的方法。

PRRS病毒感染发病机理方面的突破是该病毒对分化巨噬细胞(肺部、淋巴组织和胎盘组织)的特殊嗜性，并且由于该病毒具有免疫规避和免疫调节的能力，它可以持续存在。该病毒与巨噬细胞分子之间的完美的相互作用可以解释这种特殊的嗜性。

一切均始于病毒外壳上的GP5/M复合体与细胞膜上镶嵌的糖蛋白上的硫酸肝素配基之间的互动。这种病毒-糖之间的弱作用使得病毒能够在“糖的森林”的树叶顶端滑过，直到它找到真正的受体，唾液酸粘附蛋白。GP5/M复合体上的唾液酸与这种凝集素结合。病毒与唾液酸粘附蛋白结合会激活网格蛋白介导内吞作用。于是病毒发展为早期包涵体，这种情况下需要pH值出现一个下降才能与CD163和蛋白酶分离(组织蛋白酶E和/或一种丝氨酸蛋白酶)。在细胞之中释放壳包核酸之后进行翻译和转录、组装，最后释放。

免疫反应在控制该病毒复制方面的效率一点都不高。该病毒在进化过程中得到了许多反免疫的窍门，从而不会被消灭。这一点在感染过程当中很早的阶段就清晰地反映出来。干扰素α产生的水平极低。体液免疫开始的情况与其它病毒相似。感染一周之后可以发现壳包核酸的抗体。从这个角度来看，一切正常。达到高滴度，并且检到同型转换。然而，抗壳蛋白的抗体在后面的阶段当中才会产生。

糖基化和假冒活动是中和抗体产生延迟的主要原因。一旦产生之后，中和抗体非常有助于清除游离于细胞之外的病毒。然而，抗体无法清除感染细胞，因为病毒壳糖蛋白在质膜上没有表达。它们保留在内质网上，因此由补体和噬菌细胞进行的依赖于抗体的细胞溶解过程就不会发生。

(责任编辑：小龙女)

对欧洲PRRS毒株病毒壳糖蛋白进行肽扫描分析，结果显示，猪抗PRRS病毒抗血清可识别21个抗原区域，并且猪个体在识别模式方面存在差异。对肽特异性猪抗体进行提纯之后进行了功能分析。能够识别出GP4的aa 57-68肽的猪抗体具有强烈的PRRS病毒中和作用，成为疫苗开方向上的重点。然而，由于这一区域的巨大变异，交叉中和作用并未出现，葬送了疫苗的梦想。此外，在GP2上发现了两个中和抗原区域，GP3上发现了另外两个中和抗原区域。

GP3上其它中和抗原区域都很保守，大部分感染猪体内都发现了针对这个区域的中和抗体。对于疫苗研发来说，这是一个有趣的区域。在M和GP5上没有发现中和抗原区域。与其它病毒感染相比，细胞介导免疫时机延迟。细胞毒性T-淋巴细胞并未清除PRRS病毒感染的巨噬细胞，而自体免疫(NK)细胞的细胞毒性功能又被抑制。然而，一组尚未定义的白细胞亚群能够有效地溶解PRRS病毒感染的巨噬细胞

在开发蓝耳病疫苗和免疫程序的过程中，必须考虑到各种不同的因素。

首先，由于遗传变化，必须采用可改变的疫苗。

其次，在不同毒株之间的交叉保护方面还需要更多信息。这样才能确定，在针对特定区域/国家的疫苗中应该包含多少毒株，以及包含哪些毒株。同样非常重要的是基因型-血清型-保护型之间的联系。有些人持有的‘一种疫苗预防所有蓝耳病’的观点应该摒弃。

第三，必须找到猪体内控制蓝耳病仍然有效的机制，并通过疫苗加以激活。例如，保护过程中涉及了中和抗体。因此，它们的诱导就很重要。至于细胞介导免疫方面，需要进行更多研究，考察那组有效的白细胞亚群怎样能够激活。

第四，在猪群层次上制定控制病毒传播的措施。例如，对易感动物(阴性后备母猪、失去母源免疫之后的仔猪)进行的免疫最好应采用弱毒疫苗或载体疫苗。为了这个目的，较低的疫苗病毒滴度就足够了。而对于增强已有免疫力的情况，则应选用高抗原密度的疫苗。最好选用合适的PRRS病毒制成的高滴度弱毒苗或高剂量灭活苗。