为保证口服弱毒包内劳森氏菌(L1)疫苗Enterisol Ileitis的效果,使用前三天和后三天不能使用抗生素。在某些猪场会同时使用弱毒包内劳森氏菌疫苗与抗生素。只要该抗生素不影响LI,疫苗能正确使用就可行。本试验是研究针对胞外和胞内繁殖的LI的12种抗生素在体外最小抑菌浓度(MIC)测定。
材料与方法
将之前报道的检测系统(I)进行修改:
深冻的减毒LI活疫苗(Enterisol Ileitis)以浓度56TCID50单位/毫升接种(100μ1)感染McCoy细胞(组织培养感染剂量;在研究进行前,为了得到一个稳定的和可重复感染的易感细胞进行胞内胞外的实验)
MIC被定义为采用微量物质的测试的抑制生长的抗生素的最低浓度,实验进行3次重复。每一种抗生素单独检测其对LI胞内外生长的抑制作用。为确保实验的可以较性,同时进行实验的稀释工作。因为某些抗生素的储存溶液要用乙醇、氢氧化钠或柠檬酸盐缓冲液稀释,这些稀释液也均检测过对LI的生长无明显抵制作用。
结果
表格1显示文献中定义的断点(BP)与检测物质的MIC值相比较(R=抵抗,S=敏感)。若用LI的单抗或FITC标记的抗体检测出至少有5个细胞内或周围最少5个LI的荧光,则判定为明显的阳性结果。
结论与讨论
建立一个高标准的检测方法检测抗菌药对口服弱毒包内劳森氏菌疫苗的MIC。
体外研究中杆菌肽、新毒素、维及毒素和班贝毒素不影响LI的繁殖。体内实验中将Enterisol Ileitis以美国认可的最高剂量肌肉注射免疫猪,发现头孢噻呋和硫酸粘杆菌素也不影响LI在体内的繁殖(头孢噻呋:5mg/kg bwt(6),硫酸粘杆菌素:8mg/kg bwt(7))。氟苯尼考、替米考星、碘胺类药和联合使用磺胺增效剂和磺胺对LI的繁殖起到明显的抵制作用。胞外实验中,氨苄青毒素在浓度超过BP时能抵制LI的繁殖,而胞内MIC值低于它,说明它能有效抵制LI的繁殖。托拉毒素抵制LI的繁殖,这与之前的体内研究结果相反(6),剂量达15mg/kg bwt,不干扰同时给猪注射Enterisol Ileitis,说明托拉毒素在疫苗的活性位置肠上皮并不足以对其产生影响。
编者注:2014年6月,第23届国际猪兽医协会大会(国内通称为国际猪病大会或世界猪病大会)在墨西哥圣地坎昆召开,收到论文1020篇,展示了当今国际猪病研究的最新成果。论文目前已由中国着名猪病专家姚龙涛研究员主持编译成集,“腾骏研究所”微信平台征得姚老师同意,从本期始开设“世界猪病大会论文选译”专栏,精选部分符合当前猪病流行动态的论文陆续发布,供业内同行参考。感谢姚龙涛老师和徐静博士以及全体编译人员为中国养猪行业和猪病学界的辛勤付出。