根据本病主要发生3日龄以内仔猪,病程短,死亡率高。依据病猪病变肠段为深红色或土黄色,界限分明,肠黏膜坏死,肠浆膜下(包括镜检肠黏膜下及肌层),肠系膜和肠系膜淋巴结有小气泡形成等特点,一般可以做出诊断,如有必要可做细菌学检查和毒素试验以进一步确诊。
(一)细菌学检查
无菌采取心血、胸水、腹水、卜二脂肠和空肠内容物,肺、肝、脾、肾等脏器制作抹片,经革兰染色可见革兰染色阳性,两端钝圆的单个或双个杆菌。
十二指肠、空肠内容物在80℃水浴加热30m汕后,分别坟柙于肉肝汤和肉肝胃膜汤中,37℃培养4h,开始泛起小气泡,18h后大量的气体将试管中固体石蜡冲至试管顶部,培养基平均混浊,由橙色变黄,肝片不变黑而呈肉红色。血平板接种,厌氧培养48h,形成钮扣状菌落p型溶血。
生化试验:C型产气荚膜梭菌对糖的分解能力极强,能分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖、山梨醇、甘油等,能使其产酸产气,不分解菌糖,不形成靛基质。接种牛乳培养基37℃培养8-lOh后,分解乳糖并产酸。
(二)毒力试验
因为此病是毒血症,从肠道中检出C型魏氏梭菌尚嫌不够,必需进行毒素检查。
1.泡沫肝试验 取分离菌肉汤培养物3mL给家兔静脉打针th后将兔正法,放37℃恒温8h,剖检,见肝脏布满气体,泛起泡沫肝现象。镜检肝,可见大革兰阳性菌,其荚膜清楚浓染。
2.肠毒素试验 采取刚死亡的急性病猪的空肠内容物或腹腔积液,加等量生理盐水搅拌平均后,3OOOr/min离心30-60min,上清液经细菌滤器过滤,取滤液静脉打针体重18~22g的小鼠5只,每只打针0.2-0.5mL,同时以上述滤液与C型产气荚膜梭菌抗毒素混合,作用40min后,打针于另一组小鼠,以作对照。如打针滤液的一组小鼠迅速死亡,而对照组不死,则可确诊为本病。
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