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猪人工授精精液稀释操作规程

发布日期:2013年07月10日 来源:中国畜牧人论坛

一、精液化验室的准备工作
1、将设备打开备用:空调、双重蒸馏水器、预热箱、水浴锅、恒温载物台。检查恒温冰箱温度并检查保存精液的质量。
2、所有直接接触精液的器具用双蒸水冲洗备用。集精杯、精液瓶放预热箱预热。
3、稀释液的配制:精液稀释液宜先用现配。蒸馏水要求必须是双重蒸馏。根据需要选择不同保存时间的稀释粉。将稀释粉放入干净的容器,按比例加入双蒸水,放在磁力搅拌器上搅拌。待稀释粉溶解完全时,放在水浴锅中升温。

二、采精
1、采精频率:青年公猪和老年公猪每5天采精一次为宜,成年公猪可以每周2次。
2、采精方法:徒手采精是目前采用最广泛、有效最好的一种方法。
腹部擦洗消毒:采精人员戴两层一次性乳胶手套,挤掉包皮积尿后先用0.1%的高锰酸钾溶液将公猪包皮极其周围皮肤洗净消毒,再用清水擦洗公猪下腹部,最后将水分吸干。有些性欲旺盛的公猪,一进入采精室就会立即爬跨假母猪,所以此操作步骤一定要快。
引导公猪爬跨假母猪:一旦公猪爬跨完成,采精员应立即蹲到公猪左侧(如果是习惯左手采精则要选择公猪右侧)稍靠后的位置,并摘掉一层一次性手套,做采精准备。
公猪阴茎的把握:按摩公猪阴茎刺激,当公猪阴茎伸出时,用右手握住公猪阴茎前的螺旋部,不让阴茎来回转动,固定好阴茎后顺势轻轻地把阴茎全部拉出包皮外,注意把握阴茎的松紧度。有节奏调节压力来刺激性欲公猪,并将小指和无名指稍微张开露出阴茎前端,并用消毒纸将其擦拭干净。
接精:左手持集精杯收集精液。集精杯必须是保温的,并且是预热好的,杯口用橡皮圈固定交叉两层过滤纸过滤。公猪起初射出的精液多为精清,精子含量很少且常混有尿液和脏物,不宜收集,待射出乳白色精液时再收集。公猪第一次射精停止,再重复上述手法促使公猪第二、三次射精,直至射完为止。
3、采精结束:待公猪射完精后,采精员顺势用手将阴茎送入包皮内,让公猪自己慢慢地从假母猪上下来。采集的精液去掉过滤纸后迅速传递进入精液稀释化验室。

三、精液品质的检查
1、采精量:公猪的射精量平均为250毫升。可以用重量来计算,1g相当于1ml。
2、颜色和气味:正常的公猪精液颜色是乳白色或灰白色,具有一种特殊的腥味。精液乳白色程度越高,表明精子密度越大。颜色和气味异常的精液不宜使用。
3、 PH值:公猪精液正常的PH值在6.8-7.8之间,呈弱碱性,可用试纸进行测定。
4、精子密度:是指每毫升精液中所含的精子总数。目测误差较大,一般采用精子密度仪或精虫计数器来测定。
5、精子活力:是指精子的运动能力,用镜检视野中呈直线运动的精子数占精子总数的百分比来表示。检查方法是:取一滴精液在载玻片上,加盖盖玻片,然后放在显微镜下镜鉴,计算一个视野中呈直线运动的精子数目,来评定等级。一般分为十级,100%的精子都是直线运动为1.0级,90%为0.9级,80%的为0.8级,依次类推。活力在0.6级以下的精液不宜使用。
6、畸形精子率:正常精子形似蝌蚪,凡精子形态为卷尾、双尾、折尾、无尾、大头、小头、长头、双头、大颈、长颈等均为畸形精子。畸形精子的检查方法是:取原精液一滴,均匀涂在载玻片上,干燥1-2分钟后,用95%的酒精固定2分钟,用蒸馏水冲洗,再干燥片刻后,用美蓝或红蓝墨水染色3分钟,再用蒸馏水冲洗,干燥后即可镜检。镜检时,通常计算500个精子中的畸形精子数,求其百分率,一般猪的畸形精子率不能超过18%。

四、精液的稀释、标记、分装与保存
1、稀释后要求:稀释后精液要求活力达0.6以上,每份精液要求最低有效精子含量在40以上。
2、稀释过程:
确定稀释份数:精子密度x活力x精液量/40亿=可稀释份数
等倍稀释:用温度计确定稀释液与精液的温差,当温差小于1℃时,经行等倍稀释。将稀释液沿温度计缓缓倒入精液,并搅拌均匀。
镜检:静置半分钟,使精子适应后经行镜检,若精液质量没有较大变化可经行下一步。
按稀释份数稀释:根据稀释份数一次性将稀释液加入到精液中,搅拌、静置、镜检。
3、精液的标记:为了更好的区分不同种猪的精液,要将精液进行标记,如杜洛克用D、大约克用Y、大白用L等,也可以用公猪编号。
4、精液分装:
因为精液的分装,形势多样,单说精液瓶有100ml、80ml、30ml等等。从专业做人工授精的角度考虑,不建议用30ml的,也不推荐80ml。因为精液在输到母猪体内后会有一定比例的倒流,也就是说30ml的精液,单位容积精子密度要高,倒流后流失的有效精液数要多,所以不建议用小瓶的;还有一个就是稀释粉是为精子提供能量的,如果用30ml或者80ml来分装,那么相对100ml的保存时间要短。
还有就是,有的人工授精器械公司生产的精液瓶硬度要稍稍大一点,所以在输精过程中汇形成精液瓶负压,使精液流淌不顺,因此就产生了软包装的精液袋。但是如果使用精液袋分装精液的话需要额外的分装设备。
说到这里,再补充一点个人建议。如果精液在短时间内用不完需要保存的时候,不要分装保存,建议在集精袋中保存。这样的话精液袋的底面积要相对大于精液瓶,对于降低精子死亡率是有利的。
如果采用精液瓶保存精液,要注意将瓶内的空气尽量排干净在拧紧瓶盖。因为精液有三怕,一怕强烈震动、二怕阳光(紫外线)、三怕吸烟。

五、精液的保存
1、精液的保存方法:常用常温保存,但要注意,不能把稀释完的精液马上放入恒温箱,应该在室温下放置一段时间,让其慢慢降温到室温后再放到恒温箱进行保存。
2、精液的保存时间:保存时间除与精液本身有关系外,还与保存方法、稀释粉种类有关系。根据不同需要选择不同稀释粉,达到保存目的。
3、精液的翻动与镜检:精液在保存期间要经行翻动来保证活力,一般中效稀释粉稀释的精液每12小时翻动一次;每次精液使用之前必须经行镜检,保证配种的成功率。

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