目前,随着猪人工授精技术的广泛推广,优良品种的种公猪精液在各大育种场之间的流动也越来越频繁,如何提高猪精液的保存时间,确保猪精液在一定时间内保持高的受胎率成为整套人工授精技术的关键性技术环节。
公猪精液的体外保存方法主要有常温保存、低温保存和超低温冷冻保存。
常温保存是指在20~25℃环境下保存,保存时间比较短,对于精液稀释液的品质要求也较低,一般用于本场内现采现配。
超低温冷冻保存主要是利用液氮制造超低温环境冷冻精液,理论上通过严格的超低温冷冻方法,可以使猪精液无限期的保存,但是由于猪精液的特殊性质,猪精液内含水较多,同时精子质膜很脆弱,受冷打击造成的影响很大,复苏率很低,超低温冷冻方法比较繁琐,一般需要先离心,然后两步稀释,对稀释液的品质要求也很高,国内在猪精液冷冻方面还处于研究阶段。
低温保存主要指将精液保存在4~20℃之间,温度过低易造成精子的冷休克,精子对高温的耐受比对低温强,但是温度过高的环境下会使精子处于比较活跃的状态,自身的代谢加快,一方面加速消耗营养物质,另一方面由代谢产生的废物还会对精子的生存造成不良影响。
实验测定表明,随着保存时间的延长,精液的pH值呈下降趋势,一般在判定精子死亡时精液的pH值会下降到6.4以下,大量实验证明精液最适宜保存的温度为17℃。市场上用于低温保存精液的稀释粉种类较多,价格在7~30元左右,容易获得。低温保存方法简便,精液保存时间一般在3~5天之间,是目前生产中普遍采用的精液保存方法。通过严格控制精液生产过程可以在一定程度上提高精液保存时间。
1精液的采集和稀释
由于公猪品种和饲养条件不同,精液的保存时间会有差异。在精液采集和稀释的过程中应尽量避免精液中混入尿液、杂质和微生物。采集精液前应先挤净包皮囊内的积液,这些积液主要为残留的尿液,如果挤不干净,很容易在采精过程中混入精液,其中含有的尿液和微生物会缩短精液的保存时间;采集精液的场所应保持清洁,避免在采精过程中有较大的灰尘,采精人员应带一次性采精手套,集精杯内衬一次性食品袋,选用优质滤纸或用双层滤纸,以减少混入精液内的杂质。每次使用完成后,应立即清洗集精杯,保持杯体和内壁清洁。实验室内必须保持环境清洁干燥,并且避免阳光直射。稀释过程中要根据原精情况,适量稀释,精液太浓会降低保存时间。
2精液的分装和保存
精液的分装过程要迅速,有条件的场可考虑采用全自动精液灌装机,要确保盛有精液的容器,如精液瓶和精液袋等的卫生品质,要选用大厂家的质量有保障的产品,自动精液灌装机使用完毕后也需认真清洗,并晾干,待以后使用。
精液的保存的过程中,首先需要注意避免阳光直射,紫外灯光的直射也是不允许的;其次,经常观察冰箱温度,确保精液保存温度在15~18℃之间;第三,在精液的保存过程中,会出现聚集现象,如果聚集时间过长会导致局部精子密度过大,相互挤压,营养物质供应不足,因此需要每隔12h轻轻摇动精液一次;还有,精液分装好后不要立即放入17℃恒温冰箱,应至少在室温下放置1h,使精液温度缓慢降至室温再转入恒温箱中保存。
3精液稀释剂的选择和配制
精液稀释剂的好坏,直接影响到精液的保存时间,应根据实际需要选择精液稀释剂,市场上现有最长效稀释剂,保存时间可达30天,但是由于其含有高品质原料和特别添加成分,生产成本高,价格较高,会增加精液生产的成本,在精液比较容易获得的情况下,有些得不偿失;建议采用正规厂家生产的,品质保证的,中效和中长效稀释粉,这样可以获得较高的性价比。
配制稀释剂时,要严格按照说明进行,由于稀释剂的组成成分不同,有的需要使用温水溶解,有的需磁力搅拌器充分混匀,同时一定要注意加入水的量,不可随意增减。
总之,要达到延长精液保存时间的目的,必须严格控制整个精液生产过程中的各个细节,尽量减少混入精液中的微生物和杂质,采用品质有保证的精液稀释剂,准确判断稀释倍数,控制好精液保存的温度,定时摇动精液,尽可能避免外界环境对精液造成的不良影响,从而使精液能够在较长的时间范围内维持一定的活力,确保在各场之间交流的顺利进行。