麻醉是猪外科手术的重要部分。国内外对实验用猪的麻醉方法和麻醉剂的选择与用量等方面都做了研究,但大部分研究是针对小型实验猪的,对上海白猪这样的大型猪的麻醉研究较少。麻醉采用的方法多是气体麻醉法或混合麻醉剂法。为了研究大型猪外科适宜的麻醉方法,本试验采用3种麻醉方法,通过对照比较,以求探索出适用高效的麻醉方法。
材料与方法
1.1 猪的准备
以上海市瓦屑农场的经产母猪作为实验动物,猪场规模中等,保证了代孕母猪的数量和质量,实验前未作任何激素处理,保证了猪生活的自然环境。
1.2麻醉试剂及麻醉器械的准备
硫喷妥钠水溶液:用生理盐水将硫喷妥钠稀释至2.5%。戊巴比妥钠水溶液:用生理盐水将进口戊巴比妥钠(bioszune P91290)稀释成2.5%的水溶液备用。
青霉素、链霉素准备数瓶,作术中和术后的消炎抗菌用。
电热油汀,红外保温灯:保持手术时麻醉状态下母猪的体温。
保定绳,保定架:自制保定架,木质,便于麻醉状态下对猪进行手术操作。
50 mL注射器,静脉输液器等一次性麻醉器械。
1.3麻醉效果评价方法
良好:给药后动物自行卧倒,麻醉状态下呼吸平稳,无挣扎,可以进行移植操作。
一般:给药后动物自行倒卧,但是有刺激时明显挣扎,需辅助外力方可以操作。
较差:给药后动物不能自行倒卧,不能进行手术操作。
1.4实验方法
试验当天早晨禁食,保持空腹状态。麻醉方法:
a.硫喷妥钠水溶液麻醉:保定绳保定实验猪,使用静脉输液器和50 mL注射器耳缘静脉注射硫喷妥钠,等猪自行卧倒后,抬上保定架,用保定绳保定四肢;观察猪的麻醉状态,耳缘静脉滴注硫喷妥钠保持麻醉。
b.戊巴比妥钠水溶液麻醉:保定绳保定实验猪,使用静脉输液器和50 mL注射器耳缘静脉注射戊巴比妥钠,等猪自行卧倒后,抬上保定架,用保定绳保定四肢;耳缘静脉滴注戊巴比妥钠保持麻醉。
c.硫喷妥钠、戊巴比妥钠混合麻醉:保定绳保定实验猪,使用静脉输液器和50 mL注射器耳缘静脉注射硫喷妥钠,等猪自行卧倒后,抬上保定架,用保定绳保定四肢;观察猪的麻醉状态,耳缘静脉滴注戊巴比妥钠保持麻醉。
麻醉后,猪体进入安静平稳状态后进行外科手术。
试验结果
20例麻醉,l9例成功。麻醉过深致术后死亡 l 例,占总数的5%,是使用戊巴比妥钠水溶液麻醉造成的,猪体前期反应强烈,麻醉剂使用量多于平均使用量,造成深度麻醉,导致死亡。使用硫喷妥钠、戊巴比妥钠混合麻醉法效果最好,麻醉的12头猪中,达到麻醉良好的有l0头,与其他方法的良好率存在显著差异(见表l),麻醉量与麻醉效果见表2。
讨论
上海白猪是一种体型较大的哺乳动物,为了研究最佳的麻醉条件,在进行麻醉时,本试验采用了戊巴比妥钠水溶液麻醉,硫喷妥钠水溶液麻醉,硫喷妥钠戊巴比妥钠混合麻醉。本试验预试验l2头,正式试验8头,时间从11月一直延续到次年7月,产下克隆猪1只,证实了本胚胎移植及麻醉方法的可行性。()通过戊巴比妥钠,硫喷妥钠以及混合麻醉的比较,证明耳缘静脉滴注硫喷妥钠与戊巴比妥钠混合麻醉法,在本实验中效果最好,麻醉良好状态达到83.3%,可以长效保持正常麻醉,外科手术后对猪伤害最小。
戊巴比妥钠作为中效镇静催眠药,是实验动物麻醉的常用药,广泛用于实验动物。硫喷妥钠为超效巴比妥全麻药,常用其2.5%的溶液静脉注射,随追加次数增多,用量应适当递减。由于此药对呼吸和循环系统都有抑制,肌松不佳,故多用于全麻诱导和与其他药物复合使用。
试验的过程经历了整个冬天,手术室温度较低,手术中由于打开腹腔,母猪体热散失较多,所以保温是保证麻醉和手术成功的一个重要部分,本试验采用了电热油汀和红外保温灯多重保温的方法,保持室内温度到20℃以上,保证了试验的顺利进行。
本试验应用了3种麻醉方法,戊巴比妥钠水溶液麻醉方法在猪外科手术的麻醉中使用比较多,麻醉效果良好,缺点是麻醉前期使母猪自行卧倒的时间较长,戊巴比妥钠用量较多,操作较为繁琐。在试验过程中,尝试使用了国产异戊巴比妥钠水溶液,该溶液较为混浊,溶解不充分,有些许沉淀,麻醉时间长,手术中猪在有刺激时明显挣扎,需辅助外力方可以操作,其中一头猪在移植后,由于麻醉程度过深,术后死亡。()分析可能是使用的该种国产戊巴比妥纯度不够,造成溶解不够,使得麻醉比较迟缓,导致后期用量过度造成死亡。
硫喷妥钠水溶液麻醉在前期静脉注射比较少的量,母猪即自行卧倒,十分方便抬上保定架保定,不过麻醉时间较短,移植中猪痛感明显,挣扎比较大,麻醉的保持量不太好控制。所以在本试验中使用次数较少。
通过比较,最后试验确定使用硫喷妥钠戊巴比妥钠混合麻醉,前期使用硫喷妥钠耳缘静脉注射,使得实验母猪快速自行卧倒,抬上保定架保定后,使用戊巴比妥钠耳缘静脉滴注,保持手术时麻醉状态,根据猪的体况和手术时猪体的反应,随时增减滴注量。试验证明该方法效果良好,麻醉良好状态达到83.3%,较其他方法数据分析差异显著(P<0.05)。
试验结果证明戊巴比妥钠水溶液麻醉,硫喷妥钠戊巴比妥钠混合麻醉均可以应用于克隆猪的胚胎移植中,麻醉效果较好,硫喷妥钠戊巴比妥钠混合麻醉的方法在实际操作中更为快捷,效率更高,在猪的外科手术中是一种安全高效经济的麻醉方法。